Informations de base sur les lecteurs de microplaques
Qu'est-ce qu'un lecteur de microplaques ?
Un lecteur de microplaques est un instrument de laboratoire utilisé pour mesurer les réactions chimiques, biologiques ou physiques, les propriétés et les analytes dans les puits d'une microplaque. Une microplaque est constituée de petits puits dans lesquels se produisent des réactions séparées. Dans la microplaque, ces réactions transforment la présence d'un analyte ou la progression des processus biochimiques en signaux optiques.
Les scientifiques des sciences de la vie et de l'industrie pharmaceutique s'efforcent d'améliorer les processus et l'efficacité des laboratoires de routine en utilisant des produits ou des instruments capables de leur faire gagner du temps. Un lecteur de microplaques peut traiter jusqu'à 3456 échantillons en quelques minutes, voire quelques secondes. Un lecteur de microplaques contribue à minimiser le temps opérationnel et à économiser les coûts de réactifs, permettant ainsi aux chercheurs de consacrer plus de temps à l'analyse des données et à la génération d'informations exploitables.
À quoi sert un lecteur de microplaques ?
Un lecteur de microplaques est utilisé pour la quantification de plusieurs dosages biologiques et chimiques dans une microplaque. Aujourd'hui, la disponibilité d'une pléthore de kits de réactifs permet l'exploitation d'un lecteur de microplaques dans différents domaines et pour de nombreuses applications différentes. Outre la recherche biologique, cellulaire, biochimique, pharmaceutique et la découverte de médicaments, tant en milieu universitaire qu'industriel, les lecteurs de microplaques sont également utilisés dans la découverte de médicaments, la recherche environnementale et l'industrie alimentaire ou cosmétique.
Principe de fonctionnement d'un lecteur de microplaques
Un lecteur de microplaques détecte les signaux lumineux produits par les échantillons qui ont été pipettés dans une microplaque. Les propriétés optiques de ces échantillons sont le résultat d'une réaction biologique, chimique, biochimique ou physique. Des réactions analytiques différentes entraînent des changements optiques différents utilisés pour l'analyse. L'absorbance, l'intensité de fluorescence et la luminescence sont les modes de détection les plus populaires et les plus fréquemment utilisés dans les laboratoires du monde entier. En outre, des modes avancés tels que la polarisation de la fluorescence, la fluorescence résolue dans le temps et AlphaScreen® sont également disponibles sur les lecteurs de microplaques.
Les mesures basées sur les microplaques détectent les signaux lumineux produits par un échantillon, convertis par un échantillon ou transmis par un échantillon. Dans le lecteur de microplaques, le signal est mesuré par un détecteur, généralement un tube photomultiplicateur (PMT). Les PMT convertissent les photons en électricité qui est ensuite quantifiée par le lecteur de microplaques. Le résultat de ce processus est un nombre qui permet de quantifier un échantillon.
En fonction de la nature des modifications du signal optique au cours d'une réaction et, par conséquent, du mode de détection, il peut être nécessaire d'exciter les échantillons sur une microplaque par de la lumière à des longueurs d'onde spécifiques. Cette lumière est généralement fournie par une lampe flash au xénon à large bande. Pour permettre l'excitation de l'échantillon uniquement par des longueurs d'onde spécifiques, la lumière produite par la lampe est sélectionnée par un filtre d'excitation ou un monochromateur spécifique. Sur les lecteurs de microplaques, pour augmenter la sensibilité et la spécificité, des filtres ou des monochromateurs sont également utilisés du côté émission/détection. Ils sont généralement placés entre la microplaque et le détecteur.
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Quels sont les tests que je voudrais faire ?
Lorsqu'un lecteur de plaques doit être acheté, les applications à mesurer sont déjà connues. Cependant, il est judicieux d'accorder plus d'attention à cette question afin de trouver le bon lecteur, à l'épreuve du temps, pour le laboratoire. D'une part, vous devrez effectuer des analyses de base pour quantifier des biomolécules telles que les acides nucléiques et les protéines, ou la viabilité des cellules. Pour toutes ces applications, il existe plusieurs solutions qui reposent sur des principes, des modes de détection et des sensibilités différents. Il est donc important de connaître à l'avance le nom exact et le fournisseur du kit ou de la chimie que vous souhaitez utiliser sur votre lecteur de plaques. D'autre part, il existe des milliers de tests qui répondent à des questions biologiques spécifiques. Il peut y avoir des solutions à des problèmes que vous résolvez habituellement avec des tests encombrants, bien que des solutions plus simples basées sur les microplaques soient disponibles. Par conséquent, l'examen de vos travaux de laboratoire quotidiens et la collecte d'informations sur la façon dont les collègues utilisent les lecteurs de microplaques constituent une étape fondamentale avant d'acheter un lecteur de plaques. Vous pouvez également trouver d'innombrables suggestions sur la manière dont un lecteur de microplaques peut simplifier vos recherches dans nos "domaines de recherche".
De quel mode de détection ai-je besoin pour mon essai ?
Les différents tests sont détectés différemment, même s'ils peuvent répondre à la même question biologique. Si vous avez déjà identifié des kits commerciaux, vous trouverez le mode de détection requis dans la notice du produit. Sinon, les modes de détection disponibles dans un lecteur de microplaques et ce pour quoi ils sont généralement utilisés sont décrits ci-dessous.
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Absorbance
L'absorbance mesure la quantité de lumière perdue (absorbée) lorsqu'elle est transmise à travers un échantillon. Les molécules absorbent souvent la lumière à une longueur d'onde spécifique et peuvent être quantifiées en mesurant leur absorbance. La capacité de sélection de la longueur d'onde est obligatoire sur un lecteur de microplaques à absorbance et peut être réalisée à l'aide de filtres, de monochromateurs ou de spectromètres. Applications typiques:
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Intensité de fluorescence (y compris FRET)
La fluorescence est l'absorption de l'énergie lumineuse et sa transformation en lumière d'émission, après l'énergie cinétique et la chaleur. Comme la lumière émise est moins énergétique que la lumière d'entrée, l'émission est toujours de longueur d'onde plus élevée. Le processus d'absorption d'énergie, de conversion d'énergie et d'émission de lumière est rapide et se produit en l'espace d'une nanoseconde. Par conséquent, la détection de l'intensité de la fluorescence se déroule comme suit dans un lecteur de plaques : excitation avec une lumière à une longueur d'onde spécifique et détection de la lumière d'émission à une longueur d'onde plus élevée à peu près en même temps. La sélection de la longueur d'onde se fait par l'intermédiaire de filtres ou de monochromateurs. L'intensité de la fluorescence est linéaire par rapport à la concentration d'un fluorophore et est donc utilisée pour quantifier les molécules fluorescentes (ou marquées par fluorescence). D'autres applications d'intensité de fluorescence utilisent un décalage de l'émission de fluorescence ou une augmentation de la fluorescence lors de l'interaction avec une molécule d'intérêt pour détecter une molécule spécifique. Les applications de fluorescence typiques détectées par un lecteur de plaques de fluorescence sont les suivantes :
Tests de viabilité cellulaire Resazurin assay, Calcein-AM Tests d'agrégation Thioflavin T (RT-QuIC) Tests d'activité enzymatique 4-methylumbelliferone (4-MU), NADH-based assays, 7-Amino-4-Methylcoumarin (AMC) Espèces réactives d'oxygène H2DCFDA assay, DCF assay Quantification des acides nucléiques Qubit assays, Quant-iT assays (e.g. PicoGreen) -
Luminescence (y compris BRET)
L'émission de lumière sans excitation préalable est appelée luminescence. La production de luminescence dans les expériences des sciences de la vie est le résultat d'une réaction chimique qui est soit spontanée, soit nécessite une catalyse enzymatique. Dans une réaction de luminescence spontanée, le substrat ainsi que les cofacteurs doivent être présents pour générer de la lumière. Pour une réaction de luminescence dépendante d'une enzyme, une enzyme fonctionnelle est essentielle. Une telle enzyme est appelée luciférase. Pour détecter la lumière émise par un test de luminescence sur un lecteur de plaques, un détecteur est nécessaire. Généralement, toute la lumière provenant d'un puits est regroupée par une lentille et guidée vers le détecteur. Par conséquent, un lecteur de plaques à luminescence ne dépend pas de filtres ou d'une source d'excitation. Pour les tests à double émission, la sélection de la longueur d'onde est réalisée par des filtres ou des monochromateurs. Ce mode de détection très sensible est utilisé pour étudier les éléments suivants :
Tests de viabilité cellulaire CellTiterGlo Dosages de rapporteurs Essai de rapporteur à double luciférase Liaison récepteur-ligand Essais basés sur la méthode BRET -
Polarisation de fluorescence
Un autre mode de détection basé sur la fluorescence utilise une lumière polarisée pour exciter la molécule fluorescente. Le changement de polarisation de la lumière émise est déterminé en mesurant l'émission dans le plan parallèle et perpendiculaire par rapport au plan de polarisation de l'excitation. Les changements de polarisation de la fluorescence résultent des différences de poids moléculaire. Les molécules petites et légères se déplacent rapidement et dépolarisent l'émission de fluorescence alors que les molécules plus grosses se déplacent lentement et conservent la polarisation de la fluorescence. Ce principe permet d'étudier ce qui suit :
Tests de liaison compétitifs Détection de nucléotides pour établir les activités enzymatiques Essais de transcréation -
AlphaScreen
La technologie AlphaScreen (Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay) utilise des billes qui libèrent de l'oxygène singulet lorsqu'elles sont excitées par une lumière rouge (680 nm). Les molécules d'oxygène singulet se déplacent jusqu'à 200 nm et réagissent avec le thioxène dans une réaction de chimioluminescence. D'autres transferts d'énergie conduisent soit à des signaux de luminescence larges entre 520 et 620 nm, soit à des signaux de longueurs d'onde discrètes. Si les billes donneuses (libérant de l'oxygène singulet) et les billes acceptrices sont à proximité immédiate, un signal luminescent est émis et peut être détecté par le lecteur. Ces billes sont généralement rapprochées par des anticorps qui se lient spécifiquement au même analyte, ou qui sont couplés à des molécules qui interagissent entre elles. Pour la détection d'AlphaScreen sur un lecteur de plaques, l'excitation à 680 nm est combinée à une lecture de la luminescence qui est retardée dans le temps, par rapport à l'excitation. L'AlphaScreen est souvent utilisé dans des applications à haut débit pour étudier les éléments suivants :
Quantification des protéines et cytokines Tests AlphaLISA Phosphorylations des protéines Tests Alpha SureFire Interactions protéine-protéine Les tests AlphaScreen -
Néphélométrie
La néphélométrie est une technique utilisée pour mesurer la quantité de turbidité d'une solution causée par la présence de particules insolubles en suspension. Lorsqu'elle est dirigée à travers une solution contenant des particules solides en suspension, la lumière est transmise, absorbée et diffusée (réfléchie par les particules). La néphélométrie quantifie directement l'intensité de la lumière diffusée par les particules insolubles.
Solubilité des médicaments Croissance microbienne -
Fluorescence à résolution temporelle
La fluorescence résolue dans le temps (TRF) est une méthode basée sur la fluorescence qui nécessite l'excitation de l'échantillon à une longueur d'onde spécifique et la détection de la fluorescence émise à une longueur d'onde différente. Par rapport à l'intensité de la fluorescence classique, l'émission dure une milliseconde au lieu d'une nanoseconde. Cela est rendu possible par les lanthanides, des terres rares dont les caractéristiques de fluorescence ont une longue durée de vie. Les lecteurs mesurent le signal d'émission avec un retard par rapport à l'excitation, ce qui évite la détection du bruit de fond et de l'autofluorescence. Le TRF est utilisé pour ces applications :
Tests métaboliques sondes solubles pour la mesure de l'acidification extracellulaire et de la consommation d'oxygène Quantification des biomolécules et des protéines Essai immunologique, DELFIA -
TR-FRET
Le FRET à résolution temporelle (TR-FRET) est une technologie de détection qui combine la fluorescence à résolution temporelle (TRF) et le transfert d'énergie par résonance de Förster (FRET). Le TR-FRET est principalement utilisé pour analyser les événements de liaison et pour le criblage de médicaments à haut débit. Le FRET décrit un transfert d'énergie entre deux fluorophores. Ce transfert dépend de la proximité spatiale entre le donneur et l'accepteur et du chevauchement entre le spectre d'émission du donneur et le spectre d'excitation de l'accepteur. Les kits TR-FRET comprennent HTRF, Lanthascreen, Transcreener et THUNDER, et sont utilisés pour ces applications :
Études sur les liaisons Essais basés sur le TR-FRET
Nos lecteurs monomodes
Ces lecteurs de microplaques peuvent mesurer un seul mode de détection (généralement l'absorbance, la luminescence ou l'intensité de fluorescence). Ces lecteurs sont le meilleur choix lorsqu'il est déjà clair que l'instrument ne sera utilisé que pour une seule application. Il s'agit généralement de tests à long terme qui bloquent le lecteur de microplaques pour d'autres mesures. Par conséquent, un seul mode de détection est suffisant. Des exemples pour de telles études sont le suivi de la croissance microbienne qui prend un ou plusieurs jours, ou les expériences sur la thioflavine T qui prennent jusqu'à 7 jours. Un lecteur à mode de détection unique satisfait votre laboratoire si vous pouvez effectuer tous vos tests dans un seul mode. Par exemple, avec les lecteurs d'absorbance, vous pourrez mesurer les activités enzymatiques, la quantité d'ADN et de protéines, la viabilité cellulaire et bien d'autres choses encore. Cependant, vous êtes limité à des tests qui peuvent avoir une sensibilité ou une spécificité plus faible que les tests utilisant d'autres modes de détection. Si vous prévoyez actuellement des applications basées sur un seul mode de détection, mais que vous n'êtes pas sûr de ce que l'avenir vous réserve, recherchez des lecteurs de plaques qui peuvent être transformés ultérieurement en instruments multimodes.
LUMIstar Omega
SPECTROstar Omega
NEPHELOstar Plus
Nos lecteurs multi-modes
Les instruments capables de lire deux modes de détection ou plus sont appelés lecteurs de microplaques multi-modes. Généralement, les lecteurs multi-modes comprennent des modes de détection d'absorbance, d'intensité de fluorescence et de luminescence, et éventuellement des modes de détection avancés. Ils offrent une plus grande flexibilité quant aux tests qu'il est possible de lire. Les lecteurs multi-modes sont recommandés lorsque de nombreux utilisateurs travaillent sur la machine, lorsque vos applications changent d'un projet à l'autre ou, si vous savez déjà que vous devez lire des tests avec différents modes de détection. En outre, un lecteur de plaques multimode est plus rentable que plusieurs lecteurs monomodes dédiés.
PHERAstar FSX
CLARIOstar Plus
VANTAstar
Omega Series
Quelle plaque j'utilise habituellement ?
6 plaques jusqu'à 96 puits
Image ©Greiner Bio-One GmbH
Plaques de 384 puits
Image ©Greiner Bio-One GmbH
Plaques de 1536 et 3456 puits
Image ©Greiner Bio-One GmbH
Plaque LVis
Quelles sont les caractéristiques qualitatives les plus importantes pour moi ?
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Sensibilité
Des lecteurs de microplaques avec la plus haute sensibilité vous permettent de lire des intensités de signal très faibles et d'avoir une meilleure résolution des signaux dans votre fenêtre de test. Ceci est très important si vos contrôles négatifs et positifs sont proches les uns des autres. Un lecteur très sensible est obligatoire pour les tests avec une très petite fenêtre de test.
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Flexibilité
Les lecteurs dotés d'une vitesse de détection élevée sont recommandés pour mesurer les plaques à haute densité (plaques à 1536 et 3456 puits), pour les cribles à haut débit, ou si une haute résolution temporelle est nécessaire pour résoudre des événements rapides (par exemple, la signalisation des seconds messagers).
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Vitesse
Si vos besoins changent pendant ou entre les projets, un lecteur de microplaques offrant de nombreuses possibilités est fortement recommandé. Pensez à la possibilité de changer de mode de détection, de passer facilement de la lecture par le haut à la lecture par le bas ou de sélectionner les longueurs d'onde dans les modes d'absorbance, de fluorescence et de luminescence sans avoir à acheter ou à installer des filtres. Ces caractéristiques sont généralement fournies par les lecteurs de plaques multimodes à monochromateur. Les lecteurs avec monochromateurs permettent en outre l'acquisition de balayages de longueurs d'onde.
De quels accessoires ai-je besoin ?
Les accessoires pour lecteurs de microplaques permettent d'étendre les capacités de votre instrument. Des fonctionnalités complémentaires spécifiques sont nécessaires pour certaines applications telles que les essais sur cellules vivantes, les lectures à débit moyen ou à faible volume.
Atmospheric Control Unit
Evaluation Plate
Filters
LVis Plate
Microplate Stacker
THERMOstar
Quel est mon budget ?
Lorsqu'il s'agit de décider d'acheter un lecteur de microplaques, le budget joue bien sûr un rôle.
Le prix d'un lecteur de microplaques dépend de l'équipement technique et du nombre de modes de détection que l'appareil peut mesurer. La fourchette de prix d'un lecteur commence à 2 500 euros/dollars pour un simple lecteur de microplaques ELISA à filtre et peut aller jusqu'à plus de 150 000 euros/dollars pour un lecteur de microplaques multimode haut de gamme avec plusieurs modes de détection et la meilleure technologie pour une sensibilité maximale et des temps de lecture plus rapides.
Mais faites attention à votre choix et ne considérez pas seulement vos besoins actuels, mais aussi vos besoins futurs en matière de lecteurs de plaques.
Gardez à l'esprit la possibilité de mettre à niveau votre lecteur de microplaques en y ajoutant des fonctionnalités ou des modes de détection supplémentaires à tout moment. Si vous avez la possibilité d'effectuer une mise à niveau ultérieurement, vous n'avez pas besoin d'acheter un lecteur de microplaques supplémentaire pour vos applications futures. Vous économisez ainsi non seulement de l'argent et de l'espace utile dans votre laboratoire, mais aussi le temps que vous devez consacrer à vous habituer à un nouveau lecteur de microplaques ou à une nouvelle marque.
Outre le coût du lecteur de microplaques proprement dit, il faut tenir compte des éventuels coûts supplémentaires cachés, tels que les frais d'entretien, d'assistance, de mise à jour des logiciels et des licences ou les forfaits de réactifs.
N'oubliez pas non plus que, bien que les lecteurs à filtre soient généralement moins chers que les instruments à monochromateur, vous devez acheter différents filtres pour différentes longueurs d'onde. Veillez à prendre en compte ces coûts également.
Pourquoi choisir un lecteur BMG LABTECH ?
BMG LABTECH est spécialisé dans la production de lecteurs de microplaques uniquement et apporte plus de 30 ans d'expertise complète dans la technologie de lecture de plaques. Cette connaissance est visible dans les résultats que nos instruments fournissent - le seul facteur qui compte dans votre laboratoire ! Les utilisateurs de BMG LABTECH peuvent avoir confiance pour obtenir les meilleurs résultats en termes de sensibilité, de vitesse et de flexibilité. De plus, nos lecteurs de microplaques multi-modes sont développés pour fournir des performances optimales pendant des années. Nos instruments sont développés, produits et testés en Allemagne et sont construits pour être extrêmement robustes et fiables.
L'un de nos labels de qualité est le classement de nos produits sur la plateforme scientifique reconnue "Select Science", où nos clients nous ont attribué 4,7 sur 5,0 étoiles. Ne manquez pas de lire ce que nos utilisateurs ont à dire sur nos lecteurs de microplaques.
Achetez uniquement ce dont vous avez besoin
Grâce à leur modularité, tous nos lecteurs de plaques en fluorescence peuvent être équipés de différents modes de détection et couvrir une multitude d'applications. Des fonctionnalités supplémentaires peuvent être mises à niveau à tout moment. Vous avez ainsi la possibilité de garder vos options ouvertes, même si vous n'utilisez pas d'emblée toutes les possibilités de votre lecteur de microplaques.
Un service et un support complets
Nous nous efforçons de vous fournir le meilleur service clientèle possible. Tous les représentants des zones de vente sont des spécialistes techniques hautement qualifiés, capables de répondre aux questions relatives au matériel, aux logiciels et à la plupart des applications. Pour les solutions d'applications les plus complexes, une équipe de spécialistes des applications est également disponible.
Logiciels multi-utilisateurs
Tous nos instruments sont livrés avec un logiciel multi-utilisateurs qui peut être installé sur autant d'ordinateurs que les utilisateurs le souhaitent, sans qu'il soit nécessaire d'acheter des licences. Les mises à jour du logiciel de nos lecteurs de microplaques sont gratuites pendant les 12 premiers mois suivant l'achat.