Lecteurs de microplaques en absorbance

Un lecteur de microplaques en absorbance est un équipement capable de détecter et de quantifier les photons lumineux absorbés et transmis par un échantillon liquide présent dans une microplaque, lorsqu'il est exposé à la lumière à une longueur d'onde spécifique.

Contrairement à la fluorescence et à la luminescence, la détection de l'absorbance est une mesure absolue quantifiée en densités optiques (DO). La DO est définie comme le rapport logarithmique entre l'intensité de la lumière qui frappe une sonde et l'intensité de la lumière qui la traverse. On peut également utiliser la transmission, c'est-à-dire la partie de la lumière qui traverse l'échantillon.

Les lecteurs de microplaques en absorbance, également appelés lecteurs de microplaquese en absorbance, sont utilisés pour différentes applications dans divers domaines tels que la recherche universitaire, en sciences de la vie, la découverte et le criblage de médicaments, les laboratoires cliniques, la biologie synthétique et le contrôle de la qualité des aliments ou de l'eau.

Comparé à un lecteur de microplaques en absorbance standard qui mesure une sonde à la fois dans une cuvette, un lecteur de microplaques peut mesurer le même test d'absorption avec un débit plus élevé. Il peut mesurer une microplaque complète de 96 puits en quelques secondes, ou des plaques de 384 ou 1536 puits en quelques minutes.

Qu'est-ce qu'un lecteur de microplaques en absorbance ?

Un lecteur de microplaques en absorbance est un instrument assez complexe, optiquement parlant. En raison de la nature du signal, ces lecteurs de microplaques nécessitent une source de lumière d'excitation, une optique pour la sélection des longueurs d'onde entrantes, un détecteur et un canal de référence.

L'échantillon est éclairé par une lumière d'une intensité spécifique. L'intensité lumineuse totale à laquelle la sonde est exposée est évaluée par un canal de référence mesuré en amont. Le détecteur de lumière est situé sur le côté opposé de la microplaque par rapport à la source de lumière. Il mesure combien de l'intensité lumineuse totale est transmise à travers la sonde et à quelles longueurs d'onde. La lumière qui ne passe pas à travers le détecteur est absorbée.

La quantité mesurée de lumière transmise peut être typiquement utilisée pour calculer la concentration d'une molécule d'intérêt, puisque la quantité de lumière absorbée est liée à sa concentration (loi de Beer-Lambert). Il est également possible d'utiliser une courbe standard et des puits de concentrations inconnues. De cette façon, les acides nucléiques, les protéines et les molécules spécifiques via ELISA peuvent être quantifiés.

Les lecteurs de microplaques en absorbance sont disponibles en tant que lecteurs autonomes et dédiés ou, dans le cadre de lecteurs de microplaques multi-modes, lorsqu'ils sont combinés à la détection de l'intensité de la fluorescence et/ou de la luminescence.

Vous souhaitez utiliser un lecteur de microplaques en absorbance dans votre laboratoire ?

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Si vous êtes sur le marché pour un nouveau lecteur de microplaques en absorbance (monomode ou multimode), il y a quelques facteurs à prendre en compte, car les performances de l'instrument peuvent affecter de manière significative la qualité de vos données de recherche.

Choix de la longueur d'onde
La capacité de sélectionner les longueurs d'onde est obligatoire pour un lecteur de microplaques en absorbance et dépend du type de détecteurs utilisés.

Deux types de détecteurs différents sont couramment utilisés : les tubes photomultiplicateurs (PMT) ou les spectromètres à dispositif de couplage de charges (CCD).

Le lecteur de microplaques basé sur la PMT nécessite un outil de sélection de la longueur d'onde entre la source de lumière et le puits. Des filtres optiques ou des monochromateurs sélectionnent la longueur d'onde souhaitée avant que la lumière ne soit envoyée à la sonde. Ainsi, seule la lumière à la longueur d'onde souhaitée est transmise, atteint le PMT et est quantifiée.

Pour balayer les spectres ou une gamme de longueurs d'onde, le lecteur de microplaques basé sur la PMT nécessite un monochromateur. Le monochromateur sélectionne les longueurs d'onde souhaitées et les mesure séquentiellement par un mouvement mécanique. Pour les mesures de plusieurs longueurs d'onde discrètes, plusieurs mesures uniques avec différents filtres ou un balayage du monochromateur sont nécessaires.

Le lecteur de microplaques basé sur un spectromètre CCD ne nécessite pas d'outil de sélection de la longueur d'onde. Le spectromètre sépare les différentes longueurs d'onde présentes dans la lumière transmise par la sonde lorsque celle-ci est dirigée vers le détecteur CCD. Celui-ci capture l'intensité de toutes les longueurs d'onde en même temps, contrairement à un monochromateur. Ainsi, les spectres, d'une ou plusieurs longueurs d'onde discrètes, peuvent être acquis en peu de temps, car aucun balayage mécanique n'est nécessaire comme dans les monochromateurs.

Si votre essai ou votre application nécessite une acquisition spectrale, les spectromètres CCD sont nettement plus rapides que les monochromateurs, car le balayage spectral mécanique n'est pas nécessaire.

Formats de microplaques compatibles
Les instruments monomodes et multimodes de BMG LABTECH sont équipés d'un spectromètre UV/vis pour les mesures d'absorbance. Celui-ci capture un spectre complet de 220 à 1000 nm en moins d'une seconde/puits.

Agitation et incubation
Lorsque vous recherchez un lecteur de microplaques en absorbance, vous devez tenir compte de la nature de vos recherches et du test que vous souhaitez effectuer. En général, l'agitation et l'incubation sont deux caractéristiques importantes. L'incubation est d'une importance capitale lorsque vous effectuez des tests enzymatiques à des températures stables, par exemple à 37 °C. Plusieurs options d'agitation permettent un mélange correct pour les applications telles que les cellules.

Compatibilité avec les cuvettes
Traditionnellement, les mesures d'absorbance étaient effectuées dans des cuvettes avec une longueur de trajet normalisée de 1 cm. Dans les microplaques, la longueur du trajet change en fonction du volume et du format de la plaque. Si des solutions aqueuses sont mesurées, la mesure en microplaque peut être normalisée en utilisant la correction de la longueur du trajet du pic d'eau. Si, malgré cette option, vous devez occasionnellement effectuer des mesures en cuvettes pour vos recherches, assurez-vous que le lecteur de microplaques de votre choix dispose d'un port intégré pour cuvettes, comme le SPECTROstar Nano, ou d'adaptateurs de plaque pour mesurer les cuvettes horizontalement, comme la plaque LVis.

Logiciel de réduction des données
En général, le logiciel qui fait fonctionner le lecteur de microplaques est une partie très sous-estimée de l'ensemble. Pour certains lecteurs, le logiciel se contente de contrôler le processus de mesure et de fournir une sortie de données de dosage brutes. Dans d'autres cas, il peut effectuer une analyse complexe des données.

Un logiciel complet, facile à utiliser et flexible peut vous faciliter la vie, simplifier la détection et l'analyse des données afin que vous puissiez tirer le meilleur parti de votre instrument.

Les fonctions de calcul les plus utiles pour les tests d'absorbance comprennent la soustraction automatique du blanc, le calcul automatique des concentrations sur la base des courbes standard pour les tests ELISA ou de la loi de Beer-Lambert, les rapports 260/280, les corrections de la longueur du trajet et les constantes enzymatiques telles que K_m et V_max.

Sur le progiciel BMG LABTECH, les essais les plus courants disposent de protocoles prédéfinis spécifiques à l'essai rapide et de modèles d'analyse dédiés. Grâce à ces solutions dédiées, l'acquisition et l'analyse s'effectuent en un seul clic de souris, permettant aux chercheurs de réaliser des expériences rapidement et facilement.

Nos lecteurs de microplaques en absorbance

La détection de l'absorbance peut être effectuée sur les lecteurs de microplaques multimodes PHERAstar FSX, CLARIOstar Plus, VANTAstar, FLUOstar et SPECTROstar Omega, et sur les lecteurs de plaques monomodes SPECTROstar Nano.

Tous nos lecteurs de microplaques en absorbance sont équipés d'une lampe flash au xénon à haute intensité et d'un spectromètre CCD.

BMG LABTECH a été la première société à utiliser un spectromètre UV/vis au lieu de filtres ou de monochromateurs pour la détection de l'absorbance. Lorsque la sonde est éclairée par une lampe flash au xénon de forte puissance, le spectromètre UV/vis ultra-rapide de BMG LABTECH recueille la totalité du spectre au lieu d'une longueur d'onde spécifique. Il capte toutes les longueurs d'onde de 220 à 1000 nm à une résolution de 1-10 nm en moins de 1 seconde par puits.

La détection de l'absorbance par filtre (basée sur la PMT) est également disponible sur le FLUOstar Omega.

PHERAstar FSX

Le meilleur et le plus sensible lecteur de plaque HTS

CLARIOstar Plus

Le lecteur de plaque le plus flexible pour le développement de vos tests

VANTAstar

Lecteur de plaques flexible et convivial

Omega Series

Une gamme de lecteurs de microplaques monomodes et multi-modes évolutive

SPECTROstar Nano

Lecteur de plaque d'absorbance avec port cuvette

Quelles analyses peuvent être mesurées par un lecteur de microplaques en absorbance ?

L'absorbance est l'un des modes de détection les plus populaires pour les applications des sciences de la vie. Par conséquent, il existe une multitude de kits et de réactifs disponibles sur le marché pour les applications et les types de tests les plus divers qu'un lecteur de microplaques à absorption peut couvrir en tant qu'instrument monomode ou multimode. Plusieurs dosages colorimétriques ont été adaptés aux plaques ou directement.

L'une des applications les plus courantes est la quantification de l'ADN/ARN à 260 nm. Il est également possible de quantifier une protéine spécifique en solution, généralement par dosage immuno-enzymatique (ELISA). Plusieurs méthodes colorimétriques sont également disponibles pour la quantification des protéines. Dans l'article de notre blog "Mesure des protéines : trouver une méthode adaptée", vous trouverez des descriptions détaillées des méthodes suivantes: Bradford, BCA et des conseils pour vous aider à choisir.

Une autre application que le lecteur de microplaques en absorbance peut mesurer est la croissance cellulaire chez les bactéries et les levures en mesurant la "densité optique à 600 nm" (OD600) ou la viabilité cellulaire par des tests colorimétriques.

Exemples de mesures effectuées avec les lecteurs de microplaques BMG LABTECH en Absorbance :

Voici des exemples de mesures d'absorbance effectuées sur des lecteurs de microplaques BMG LABTECH :

AN 303: Detection of plant-synthesized nanoparticles and their antibacterial capacity

AN 299: Absorbance-based methods for protein quantification on BMG LABTECH instruments

AN 272: Overview of ELISA assays and NADH/NADPH conversion detection

Voir la liste complète des notes d'application sur l'absorbance.

Pourquoi choisir un lecteur de microplaques BMG LABTECH en Absorbance ?

BMG LABTECH est spécialisé dans la production de lecteurs de microplaques uniquement et apporte plus de 30 ans d'expertise complète dans la technologie de lecture de plaques. Cette connaissance est visible dans les résultats que nos instruments fournissent - le seul facteur qui compte dans votre laboratoire ! Les utilisateurs de BMG LABTECH peuvent avoir confiance pour obtenir les meilleurs résultats en termes de sensibilité, de vitesse et de flexibilité. De plus, nos lecteurs de microplaques multi-modes sont développés pour fournir des performances optimales pendant des années. Nos instruments sont développés, produits et testés en Allemagne et sont construits pour être extrêmement robustes et fiables.

Achetez uniquement ce dont vous avez besoin
Grâce à leur modularité, tous nos lecteurs de plaques en fluorescence peuvent être équipés de différents modes de détection et couvrir une multitude d'applications. Des fonctionnalités supplémentaires peuvent être mises à niveau à tout moment. Vous avez ainsi la possibilité de garder vos options ouvertes, même si vous n'utilisez pas d'emblée toutes les possibilités de votre lecteur de microplaques.

Un service et un support complets
Nous nous efforçons de vous fournir le meilleur service clientèle possible. Tous les représentants des zones de vente sont des spécialistes techniques hautement qualifiés, capables de répondre aux questions relatives au matériel, aux logiciels et à la plupart des applications. Pour les solutions d'applications les plus complexes, une équipe de spécialistes des applications est également disponible.

Logiciels multi-utilisateurs
Tous nos instruments sont livrés avec un logiciel multi-utilisateurs qui peut être installé sur autant d'ordinateurs que les utilisateurs le souhaitent, sans qu'il soit nécessaire d'acheter des licences. Les mises à jour du logiciel de nos lecteurs de microplaques sont gratuites pendant les 12 premiers mois suivant l'achat.

Lecteur de microplaques en absorbance

Informations de base sur les lecteurs de microplaques en absorbance

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Qu'est-ce qu'un lecteur de microplaques en absorbance ?

Que faut-il prendre en compte lors du choix d'un lecteur microplaques en absorbance ?