형광 플레이트 리더에 대한 기본 정보
형광 플레이트 리더란 무엇입니까?
형광 플레이트 리더 (또는 형광 마이크로플레이트 리더)는, 마이크로플레이트에 존재하는 형광 물질을 특정 파장의 빛으로 여기될 때 방출되는 빛 광자를 검출하고 정량화할 수 있는 장비입니다.
형광 마이크로플레이트 리더는 일반적으로 형광 강도 및 FRET을 측정하는 데 사용됩니다. 형광 편광 또는 시간 분해 형광 및 TR-FRET와 같은 형광 기반 검출 모드는 감도가 좋지 않거나 단독 모드 형광 마이크로플레이트 리더로는 전혀 측정되지 않을 수 있습니다. 따라서, 형광 측정을 포함한 모드와 흡광 및 발광을 측정하려면 다기능 측정 모드 마이크로플레이트 리더가 필요합니다.
형광 마이크로플레이트 리더는 일반적으로 광원, 여기광 선택을 위한 광학 시스템(즉, 필터 및/또는 모노크로메이터), 방출광 선택을 위한 광학 시스템 및 디텍터, 하나 이상의 광전자 증배관 튜브 (PMT)를 포함합니다. 이러한 구성품은, 형광 또는 발광에 의해 생성된 광자를 전기로 변환한 다음 마이크로플레이트 리더에 의해 정량 및 숫자화 합니다.
흡광도와 달리 형광 검출은 절대적인 측정값이 아닙니다. 형광 신호의 강도는 샘플에서 방출되는 빛의 세기에 따라 상대적인 형광값 (RFU)을 측정합니다.
형광 플레이트 리더는 독립형 전용 단독 리더로 사용하거나 흡광도 및/또는 발광 측정 모드가 함께 내장된 다기능 측정 모드 마이크로플레이트 리더에서 사용할 수 있습니다.
형광 플레이트 리더는 생명 과학 연구, 신약 개발 및 스크리닝, 임상 실험실, 합성 생물학 및 식품 또는 수질 모니터링과 같은 다양한 분야에 사용됩니다.
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형광 플레이트 리더 (단독 또는 다기능 측정 모드)를 구입하고자 한다면, 기기의 성능에 따라 연구 결과에 상당한 영향을 미칠 수 있으므로 몇 가지 요소를 고려해야 합니다.
민감도
정량 측정을 위해 형광 플레이트 리더는 일반적으로 흡광도 리더기보다 더 높은 감도를 제공합니다. 보다 더 향상된 감도를 가진 형광 마이크로플레이트 리더는 더 나은 결과 분석, 반복 재현성 증대, 대조군 대비 샘플 측정값의 차이를 보다 높게 획득할 수 있습니다. 따라서, 민감도가 높은 장비를 사용하면, 시약 및/또는 샘플의 양을 줄일 수 있어 결과적으로 분석 비용을 줄일 수 있습니다.
측정 범위 (다이나믹 레인지)
형광 강도 측정시, 샘플은 종종 광범위한 농도 범위로 인해, 샘플 반응 값에 따라 매우 낮은 값에서 매우 높은 값까지 광범위하게 분포하기도 합니다. 또한, 효소 또는 세포 기반 동역학 분석의 샘플은 동역학 분석 과정에서 시간 경과에 따라 최대 신호가 축적되기 때문에 신호 강도를 예측하기 어려운 경우가 많습니다.
이러한 경우 매우 높은 값을 나타내는 샘플은 형광 값이 포화되기도 하고, 매우 낮은 값을 나타내는 샘플은 음성 대조군과의 값을 식별할 수 없기도 합니다. 이로 인해, 하나의 디텍터 설정 값으로 광법위한 농도 범위에 있는 샘플 측정을 한 번의 측정 조건에서 모든 값을 측정하기 어려울 수 있습니다.
측정 범위가 넓은 실험의 경우, 최적의 값을 획득하기 위해 희석 배수 조절 등 시행 착오 과정을 진행하게 됩니다. 그러나, PHERAstar FSX, CLARIOstar Plus와 VANTAstar 장비는 이러한 과정을 생략함으로써 시약 및 시간 낭비를 피할 수 있고, 한 번의 실행으로 매우 다양한 농도의 영역대의 샘플을 측정할 수 있습니다. 이는 독자적인 Enhanced Dynamic Range 기능이 탑재되어 있기 때문이며, 샘플의 가장 넓은 측정 범위(10^8 농도)를 측정하는 유일한 장비입니다.
파장 선택
형광 마이크로플레이트 리더의 파장 선택은 여기 및 방출 모두에 필수적이며, 샘플과 마이크로플레이트에서 발생하는 광산란 또는 자가형광으로 인해 발생하는 불특정한 백그라운드 값을 줄일 수 있습니다.
형광 마이크로플레이트 리더의 파장 선택은 여기 및 방출 모두에 필수적이며, 샘플과 마이크로플레이트에서 발생하는 광산란 또는 자가형광의 불특정한 백그라운드 값을 줄일 수 있습니다.
이 목적을 위해 필터 또는 모노크로메이터를 사용할 수 있습니다. 필터는 일반적으로 민감한 반면 모노크로메이터는 더 많은 유연성을 제공합니다. CLARIOstar Plus와 VANTAstar는 선형 가변 필터(LVF) 모노크로메이터 시스템을 이용하여, 필터 방법의 장점인 민감도를 높인 고감도의 모노크로메이터 기반 마이크로플레이트 리더입니다. 형광 발광 측정에 사용할 수 있으며, 형광 물질을 스캐닝 목적에 매우 유용합니다.
또한 형광 플레이트 리더에서 두 개의 방출 채널을 동시에 감지하는 기능은 FRET 분석에 매우 유용합니다. 이 옵션은 측정 시간을 절반으로 줄이고 결과 차이를 최소화합니다. 이 기능은, SDE(Simultaneous Dual Emission) 감지 사양으로, PHERAstar FSX는 기본, LUMIstar Omega 및 FLUOstar Omega에서는 선택할 수 있습니다.
호환 가능한 마이크로플레이트 종류
생명 과학 연구에서 형광 분석은 일반적으로 96 웰 마이크로플레이트를 사용합니다. 그러나 샘플 수가 많거나 고가의 시약 또는 측정 시간을 단축하고자 하는 경우에는, 384 웰 및 1536 웰 형태의 마이크로플레이트를 사용합니다. 고려 중인 형광 마이크로플레이트 리더가 어떤 형태의 마이크로플레이트 종류를 사용할 수 있는지 확인하십시오. 또한 흡광도, 형광 및 발광 검출에는 각 목적에 맞는 플레이트를 사용하여야 최적의 결과를 획득할 수 있습니다.
시약 분주기
형광 플레이트 리더 구입을 고려할 때 실행하려는 분석의 특성을 고려해야 합니다. 효소 동역학 분석 또는 실시간 세포 기반 반응의 경우 시약 분주기를 사용하는 것이 유용할 수 있습니다. 파이펫으로 시약을 웰에 분주하면 시간에 따른 중요한 반응 결과를 잃을 위험이 있습니다. 특히, 수 초 내 반응이 일어나는 실험의 경우에는 결과를 감지하기 전에 이미 사라졌을 수 있습니다. 시약 분주기를 장착하면, 샘플을 분주하고 동시에 신호를 감지 및 측정한 후 다음 샘플로 이동할 수 있습니다.
환경 제어
장기간 살아있는 세포 기반 분석을 고려한다면, 구입할 장비가 내부 가스 환경을 제어할 수 있는 기능이 있는지 확인하십시오.
Omega 시리즈, VANTAstar 및 CLARIOstar Plus에는 대기 제어 장치(ACU)를 장착할 수 있습니다. ACU는 살아있는 세포를 분석하는 모든 응용 분야에 이상적인 환경을 제공합니다. ACU는 마이크로플레이트 리더 챔버 내에서 O2 및 CO2 가스 농도를 독립적으로 조절합니다. 교반 기능 및 온도 조절과 결합된 ACU는 정상적인 세포 성장에서 저산소 분석에 이르기까지 모든 세포 기반 분석을 위한 진정한 "워크 어웨이" 솔루션을 제공합니다.
결과 분석 소프트웨어
마이크로플레이트 리더에 포함된 소프트웨어 기능을 매우 과소평가하기도 합니다. 일부 기기의 경우, 소프트웨어는 측정 과정만 제어하고 숫자로 표현된 결과만을 제공하기도 합니다. 또 다른 경우에는 복잡한 결과 분석까지 수행할 수 있는 소프트웨어를 제공합니다.
포괄적이고 사용하기 쉽고 편리한 분석 소프트웨어는 결과 분석 과정을 단순화하여 장비를 최대한 활용할 수 있도록 합니다.
형광 분석을 위한 가장 유용한 기능은, 백그라운값 제거, 표준 곡선을 기반으로 한 농도 자동 계산, Km 및 Vmax와 같은 효소 상수값을 계산하는 것입니다.
BMG LABTECH사 분석 소프트웨어는 내장된 특정 프로토콜과 전용 분석 템플릿이 있어, 마우스 클릭 한 번으로 기기 수행 및 및 분석이 가능하므로 연구자가 쉽고 빠르게 실험을 수행할 수 있습니다.
CLARIOstar Plus
VANTAstar
Omega Series
형광 플레이트 리더로 측정할 수 있는 실험은 무엇입니까?
형광 강도는 생명 과학 응용 분야에서 가장 널리 사용되는 검출 모드 중 하나로, 단독 또는 다양한 응용 및 분석을 할 수 있는 다기능 측정 모드 모델이 있으며, 분석 유형에 따라 상용화된 제품을 사용하여 실험 목적에 맞게 측정할 수 있습니다.
형광 기법을 활용한 일반적인 응용 분야는 DNA/RNA 정량, 칼슘 분석(유속 및 신호), 효소 활동, 유전자 발현, GPCR을 위한 2차 메신저 신호, 단백질-핵산 상호 작용, 트립토판 정량, 분자 표지, 폐수 분석용 바이오센서 등입니다.
세포 기반의 대표적인 응용 분야로는 세포 사멸 분석, 세포 증식, 형질 감염 효율 및 세포 독성 측정입니다.
단백질 상호작용은 FRET(Fluorescence Resonance Energy Transfer)를 통해 감지할 수 있습니다. FRET는 기증자와 수용자 사이의 에너지 전달을 기반으로 하는 이중 염료 형광 검출 분석법입니다. 기증자와 수용자가 근접한 경우(10-100 Å), 기증자 형광단의 여기는 직접 여기되지 않고 빛을 방출할 수용자 형광단에 에너지를 전달합니다.
형광 강도/FRET 측정 사례:
다음은 BMG LABTECH사 형광 플레이트 리더에서 측정한 형광 및 FRET 측정 사례입니다.
- AN368: Pyruvate kinase inhibitor measurements and effortless data analysis using the MARS data analysis software
- AN364: Antioxidant capacity determination in plant samples and food products with the microplate reader CLARIOstar Plus
- AN353: Studying the molecular mechanism of viral replication in real time using the CLARIOstar Plus with ACU
형광 기법을 이용한 애플리케이션 노트의 전체 목록을 참조하십시오.
BMG LABTECH사 형광 플레이트 리더를 선택해야 하는 이유는 무엇일까요?
BMG LABTECH사는, 플레이트 기반 측정 기술에 대한 30년 이상의 완벽한 전문 기술을 기반으로, 마이크로플레이트 리더만을 전문적으로 생산하는 회사입니다. 실험실에서 매우 중요한 요소인, 민감도, 속도 및 사용의 편리함, 그리고 최상의 결과를 얻는 신뢰할 수 있는 장비를 제공합니다. 또한 수년간 최적의 성능을 얻도록 개발되었으며, 모든 전 장비는 독일에서 개발, 생산 및 테스트되었으며 매우 견고하고 신뢰할 수 있도록 제작되었습니다.
품질 인증 중 하나는 고객이 별 5.0점 만점에 4.7점을 준 기존 과학 플랫폼 "Select Science"의 제품 순위입니다. 마이크로플레이트 리더에 대한 사용자의 의견을 남기세요.
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모듈성으로 인해 당사의 모든 형광 플레이트 리더는 다양한 감지 모드를 장착하고 다양한 응용 분야를 다룰 수 있습니다. 추가 기능은 언제든지 업그레이드할 수 있어, 바로 사용하지 않더라도 선택 사양은 추후 설치가 자유롭습니다.
완벽한 서비스 및 기술 지원을 제공합니다.
최고의 고객 서비스를 제공하기 위해 노력하고 있습니다. 고도로 훈련된 담당자는 하드웨어, 소프트웨어 및 대부분의 애플리케이션 질문을 지원할 수 있으며, 복잡한 문제의 경우에는 직접 온라인 및 원격지원으로 문제를 효율적으로 해결합니다.
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당사의 모든 기기는 라이선스를 구매할 필요 없이 사용자가 필요한 만큼, 무제한으로 컴퓨터에 설치할 수 있는 소프트웨어를 제공합니다. 당사 마이크로플레이트 리더의 소프트웨어 무료 업데이트는 구매 후 첫 12개월입니다.