발광 플레이트 리더

발광 플레이트 리더에 대한 기본 정보

발광 플레이트 리더 (또는 루미노미터, 발광 마이크로플레이트 리더)는 마이크로플레이트에서 화학적, 생화학 또는 효소 반응에 의해 방출되는 광자를 감지하고 정량화할 수 있는 장비입니다. 발광 검출은 흡광도와 같은 절대적인 측정이 아닌, 샘플에서 방출되는 광 신호의 상대적인 값, RLU(Relative Light Units)을 측정합니다.

발광 플레이트 리더는 생명 과학 연구, 신약 개발 및 스크리닝, 임상 실험실, 합성 생물학 및 식품 또는 수질 모니터링과 같은 다양한 분야에 사용됩니다.

발광 플레이트 리더란 무엇입니까?

발광 플레이트 리더는 형광 플레이트 리더에 비해 광학적으로 매우 간단한 기기입니다. 발광 신호의 특성으로 인해 발광 마이크로플레이트 리더는 여기 광원이나 여기 파장 선택을 위한 광학 장치(흡광도 또는 형광 검출에 필요한 경우)가 필요하지 않습니다. 챔버, 샘플의 광 신호를 검출기로 전달하기 위한 광학 시스템, 검출기(광전자 증배관, PMT) 및 발광(방출) 파장 선택을 위한 광학 시스템만 있으면 됩니다.

발광 마이크로플레이트 리더를 구입하려는 경우 기기의 성능이 분석 결과의 품질에 상당한 영향을 미칠 수 있으므로 몇 가지 요소를 고려해야 합니다.

민감도

발광은 일반적으로 생화학 또는 화학 반응에 의해 생성되며 여기광이 필요하지 않습니다. 결과적으로 흡광도나 형광에 비해 일반적으로 더 높은 감도를 제공합니다. 샘플과 마이크로플레이트 모두에서 광산란 또는 자가형광을 유발할 수 있는 여기 프로세스가 없기 때문에 불특정 백그라운 값 또는 노이즈 신호는 형광 측정 대비 극히 낮습니다.

그럼에도 불구하고 더 나은 감도를 가진 발광 마이크로플레이트 리더는 더 나은 결과 분석, 반복 재현성 증대, 대조군 대비 샘플 측정값의 차이를 보다 높게 획득할 수 있습니다. 따라서, 민감도가 높은 장비를 사용하면, 시약 및/또는 샘플의 양을 줄일 수 있어 결과적으로 분석 비용을 줄일 수 있습니다.

측정 범위 (다이나믹 레인지)

마이크로플레이트의 발광 반응은 일반적으로 효소 반응을 시작하기 위해 기질을 웰에 추가하는 것을 기반으로 합니다. 반응이 시작되고 기질의 양이 효소에 의해 대사되면 반응이 소진되고 새로운 시약과 샘플을 새로운 마이크로플레이트에서 사용하지 않는 한 다시 반응이 일어나지 않습니다. 따라서 발광 플레이트 리더는 샘플을 한 번에 측정해야합니다. 이렇게 하면 분석을 반복 측정하지 않아도 되고, 시약 소모를 절약할 수 있습니다.

단일 마이크로플레이트에 광범위한 신호 강도에 걸쳐 있는 샘플이 있는 경우 한 번의 설정으로 결과를 획득하기 어려울 수 있습니다. 고농도의 샘플은 발광 검출기 값을 포화시킬 수 있고, 매우 낮은 농도의 샘플은 블랭크와 구분이 어려울 수 있습니다.

측정 범위가 넓은 실험의 경우, 최적의 값을 획득하기 위해 희석 배수 조절 등 시행 착오 과정을 진행하게 됩니다. 그러나, CLARIOstar Plus와 VANTAstar 장비는 이러한 과정을 생략함으로써 시약 및 시간 낭비를 피할 수 있고, 한 번의 실행으로 매우 다양한 농도의 영역대의 샘플을 측정할 수 있습니다. 이는 독자적인 Enhanced Dynamic Range 기능이 탑재되어 있기 때문이며, 샘플의 가장 넓은 측정 범위(10^8 농도)를 측정하는 유일한 장비입니다.

파장 선택

발광 플레이트 리더의 파장 선택 기능(필터 또는 모노크로메이터)은 특히 기본 발광 측정할 때 필수 사항이 아닙니다(흡광도 또는 형광 측정인 필수). 그러나 응용 프로그램에 따라, 특히 다중 신호를 사용하는 발광 분석의 경우 방출 파장을 선택할 수 있는 가능성이 유리합니다. 이 목적을 위해 필터 또는 모노크로메이터를 사용할 수 있습니다. 이 옵션은 새로운 분석을 개발하거나 여러 발광 신호를 감지할 때 유용합니다. 또한 백그라운값을 줄여 분석을 최적화하는 데 도움이 됩니다.

필터는 일반적으로 민감한 반면 모노크로메이터는 더 많은 유연성을 제공합니다. PHERAstar FSX, CLARIOstar Plus와 VANTAstar는 선형 가변 필터(LVF) 모노크로메이터 시스템을 이용하여, 필터 방법의 장점인 민감도를 높인 고감도의 모노크로메이터 기반 마이크로플레이트 리더입니다. 형광 발광 측정에 사용할 수 있으며, 형광 물질을 스캐닝 목적에 매우 유용합니다.

또한 발광 플레이트 리더에서 두 개의 방출 채널을 동시에 감지하는 기능은 BRET 및 NanoBRET 분석에 매우 유용합니다. 이 옵션은 측정 시간을 절반으로 줄이고 결과 차이를 최소화하며, SDE(Simultaneous Dual Emission) 감지 사양으로 LUMIstar Omega 및 PHERAstar FSX에서 사용할 수 있습니다.

호환 가능한 마이크로플레이트 종류

일반적으로 기본 발광 분석은 96웰 플레이트에서 측정됩니다. 그러나 샘플이 여러 개이거나 귀중한 시약 또는 시간을 절약하려는 경우 384웰 및 1536웰 형식도 사용할 수 있습니다. 선택한 루미노미터가 계획하고 하는 마이크로플레이트를 사용할 수 있는지 확인하십시오. 또한 흡광도, 형광 및 발광 검출에는 서로 다른 종류를 사용합니다. 작은 웰의 형태의 고밀도 마이크로플레이트를 사용할 때는 샘플 간 빛의 간섭현상도 고려해야 합니다.

간섭 효과

빛의 간섭 현상은 웰을 측정하는 동안 마이크로플레이트에 있는 인접한 웰의 빛이 검출기에 의해 포착될 때 발생합니다. 이는 잘못된 결과로 이어집니다. 간섭 현상은 특히 고밀도 플레이트(384웰 이상)를 사용할 때 중요한 요소입니다. 검출기가 간섭 현상을 감지하는 것은 마이크로플레이트 웰의 윗부분과 플라스틱 벽에서 발생하는 빛입니다.

CLARIOstar Plus, VANTAstar 및 PHERAstar FSX와 같은 하이엔드 발광 플레이트 리더는 인접한 웰에서 나오는 빛을 물리적으로 차단하여 이 요인을 보완하고, 특정 알고리즘을 사용하여 플라스틱 벽에서 발생하는 빛의 양을 계산하여 샘플 값에서 제거할 수 있습니다.

플래시 또는 글로우 반응

발광 플레이트 리더를 구입 고려할 때는 실행하려는 분석의 특성을 고려해야 합니다. 동역학에 따라 발광 분석은 플래시 및 글로우 반응으로 나눌 수 있습니다. 플래시 발광은 매우 짧은 시간(보통 몇 초) 동안 수명이 짧은 반응이며, 글로우 발광은 오히려 수명이 깁니다. 반응은 몇 분 동안 지속될 수 있지만 일반적으로 플래시 대비 빞의 값이 낮습니다.

모든 발광 플레이트 리더는 글로우 반응을 감지할 수 있습니다. 플래시 분석은 대신 시약 분주기를 사용해야 합니다. 파이펫으로 시약을 웰에 분주하면 시간에 따른 중요한 반응 결과를 잃을 위험이 있습니다. 특히, 수 초 내 반응이 일어나는 실험의 경우에는 결과를 감지하기 전에 이미 사라졌을 수 있습니다. 시약 분주기를 장착하면, 샘플을 분주하고 동시에 신호를 감지 및 측정한 후 다음 샘플로 이동할 수 있습니다.

시약 분주기는 DLR(Dual Luciferase Reporter) 분석에도 유용합니다. 두 개의 루시페라아제의 활성은 단일 샘플에서 순차적으로 측정하고 타겟 유전자의 전사 및 형질감염 제어를 확인할 수 있습니다. 시약 분주기를 사용하면 약 4초 내 결과를 획드할 할 수 있습니다.

BMG LABTECH사의 전용 루미노미터인 LUMIstar^® Omega와 PHERAstar^® FSX, CLARIOstar^® Plus, VANTAstar^TM 및 FLUOstar^® Omega를 포함한 다중 모드 마이크로플레이트 리더에서 발광을 측정할 수 있습니다.

당사의 모든 루미노미터는 Dual-Luciferase Reporter 분석에 대해 인증되었으며 발광에 최적화되어 백그라운드가 낮은 PMT(광전자 증배관)를 사용하고 정밀한 시약 분구기를 장착할 수 있습니다.

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발광 플레이트 리더로 측정할 수 있는 실험은 무엇습니까?

단일 모드 또는 다중 모드 기기(예: 흡광도 및 형광 검출 포함)인 루미노미터는 효소 반응, Dual Luciferase Reporter 유전자(DLR), 발광 칼슘 플럭스 및 화학발광 ELISA를 포함한 광범위한 분석을 처리할 수 있습니다.

루미노미터는 세포 생존력, 세포독성 및 세포사멸 분석, 신호 경로 및 대사 분석, 세포의 Mycoplasma 오염 분석을 수행할 수 있습니다.

근접성 또는 단백질-단백질 상호 작용 분석도 BRET 및 nanoBRET 분석으로 측정할 수 있습니다.

BRET(Bioluminescence Resonance Energy Transfer)는 생물발광 기증자와 형광 수용자 사이의 공명 에너지 전달을 기반으로 하는 이중 리포터 발광 검출 분석법입니다. 기증자가 생물 발광에 의해 광자를 방출하기 때문에 형광 여기가 필요하지 않습니다.

발광 측정 사례:

다음은 BMG LABTECH사 발광 플레이트 리더에서 측정한 발광 실험 사례입니다.

발광 기법을 이용한 애플리케이션 노트의 전체 목록을 참조하십시오.

BMG LABTECH사 발광 플레이트 리더를 선택해야 하는 이유는 무엇일까요?

BMG LABTECH사는, 플레이트 기반 측정 기술에 대한 30년 이상의 완벽한 전문 기술을 기반으로, 마이크로플레이트 리더만을 전문적으로 생산하는 회사입니다. 실험실에서 매우 중요한 요소인, 민감도, 속도 및 사용의 편리함, 그리고 최상의 결과를 얻는 신뢰할 수 있는 장비를 제공합니다. 또한 수년간 최적의 성능을 얻도록 개발되었으며, 모든 전 장비는 독일에서 개발, 생산 및 테스트되었으며 매우 견고하고 신뢰할 수 있도록 제작되었습니다.

품질 인증 중 하나는 고객이 별 5.0점 만점에 4.7점을 준 기존 과학 플랫폼 "Select Science"의 제품 순위입니다. 마이크로플레이트 리더에 대한 사용자의 의견을 남기세요.

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모듈성으로 인해 당사의 모든 형광 플레이트 리더는 다양한 감지 모드를 장착하고 다양한 응용 분야를 다룰 수 있습니다. 추가 기능은 언제든지 업그레이드할 수 있어, 바로 사용하지 않더라도 선택 사양은 추후 설치가 자유롭습니다.

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최고의 고객 서비스를 제공하기 위해 노력하고 있습니다. 고도로 훈련된 담당자는 하드웨어, 소프트웨어 및 대부분의 애플리케이션 질문을 지원할 수 있으며, 복잡한 문제의 경우에는 직접 온라인 및 원격지원으로 문제를 효율적으로 해결합니다.

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